10.3969/j.issn.1001-9448.2011.07.001
不同浓度马兜铃酸对肾小管上皮细胞的毒性作用以及骨形成蛋白-7的抗凋亡作用
目的 探讨不同浓度马兜铃酸(AA)对肾小管上皮细胞(RTECs)毒性作用的差异,以及BMP-7对AA所诱导RTECs凋亡的保护作用.方法 (1)用浓度分别为5、10、20、40、80、160 μg/mL AA刺激体外培养人近端肾小管上皮细胞株(HK-2细胞),应用乳酸脱氢酶(LDH)释放试验检测不同浓度AA对HK-2细胞的直接毒性作用,相差显微镜观察细胞形态学改变,用Hoechst 33258染色法观察不同浓度AA诱导的HK-2细胞凋亡核形态的改变,计算细胞凋亡率;(2)用300 ng/mL BMP-7处理经AA(20和40 μg/mL)诱导的HK-2细胞48 h,然后Hoechst 33258荧光染色检测细胞凋亡率,分光光度法检测Caspase-3蛋白酶活性.结果 当AA浓度达到80 μg/mL时,细胞LDH释放率明显升高(P<0.001);而AA浓度为10 μg/mL时,细胞凋亡率开始明显升高(P<0.001),AA浓度为40 μg/mL时,细胞凋亡率最高;BMP-7处理后,细胞凋亡率和Caspase-3蛋白酶活性明显下降(P<0.01).结论 大剂量AA致RTECs坏死,中小剂量AA致RTECs凋亡;BMP-7可减轻AA诱导的RTECs凋亡,其作用可能部分通过抑制Caspase-3酶活性而实现.
马兜铃酸、BMP-7、肾小管上皮细胞、凋亡
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R73;R78
广东省中医药局资助项目104081
2011-06-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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