流式细胞术检测小鼠全血中人血小板方法的建立

摘要：

目的 建立一种流式细胞术检测动物模型小鼠全血中人血小板(hPLTs)的方法.方法 用CO2致死SCID小鼠,立即心脏穿刺取血,用EDTA抗凝小鼠全血,备用.无菌分离5 mL人的单采血小板备用.用1%多聚甲醛固定hPLTs、小鼠全血及hPLTs/小鼠全血混合血液(V/V=1:4),4℃过夜保存.用洗涤溶液(1%PBS+1%FBS)洗涤和重新悬浮血液,将实验分为阳性对照组、阴性对照组和实验组,用相应的样本与相应抗体反应,建立检测模板.将小鼠全血和hPLTs以1:4比例混合,用小鼠全血以1:10、1:100、1:1 000、1:10 000和1:100 000按体积比稀释上述混合血液,固定,4℃过夜保存.用洗涤溶液洗涤并重新悬浮血液样本,在TruCOUNT试管中定量检测hPLTs,称为"血小板检测值".用血细胞计数仪检测单采血小板中血小板浓度,称为"血小板期望值".与血细胞计数仪检测到的"血小板期望值"成对比较,观察可靠的检测浓度范围.结果 当血小板期望值介于3 000～150 000/μL时,与血小板检测值具有较好的线性关系.结论 采用流式细胞仪方法,可以可靠地检测到hPLTs期望值介于3 000～150 000/μL浓度范围内混合在小鼠全血中的hPLTs.

关键词：流式细胞术、人血小板、小鼠全血、抗体

所属期刊栏目：31

分类号：R73;TH7

在线出版日期：2010-10-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：2049-2052