10.3969/j.issn.1001-9448.2010.12.006
siRNA抑制STAT3基因对人乳腺癌细胞的影响
目的 应用RNAi干扰技术沉默MCF-7乳腺癌细胞信号转导及转录活化因子3 (STAT3),观察乳腺癌细胞生长及凋亡情况.方法 采用MTT法观察不同浓度的重组质粒(A组:0.1 μg/mL psilencer3.0-H1-STAT3-siRNA重组质粒转染组、B组:0.2 μg/mL psilencer3.0-H1-STAT3-siRNA重组质粒转染组、C组:0.3 μg/mL psilencer3.0-H1-STAT3-siRNA重组质粒)转染MCF-7乳腺癌细胞株后对乳腺癌细胞生长抑制作用的情况;采用半定量RT-PCR法,检测重组质粒对STAT3基因表达的影响;吖啶橙染色、流式细胞术观察细胞凋亡.结果 A、B、C 3组的重组质粒对乳腺癌MCF-7细胞株有抑制作用,3组的生长抑制率48 h分别为27.17%、40.21%、26.08%,72 h分别为41.30%、65.21%、42.39%;48、72 h生长抑制率与空白组、空质粒对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);在不同浓度的重组质粒组,STAT3 mRNA表达均下降,与空白组、空质粒对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01),其中以B组表达下降更明显;吖啶橙染色结果空白组及阴性组细胞呈绿色或黄绿色荧光,实验组细胞可见较多黄色荧光,偶见红色荧光, 提示实验组细胞较多呈早中期凋亡.细胞周期分析显示重组质粒组细胞出现G0-G1期阻滞,且B组(0.2 μg/mL)细胞凋亡最明显.结论 STAT3 siRNA可以下调MCF-7乳腺癌细胞STAT3 mRNA的表达水平,抑制MCF-7细胞的生长.
乳腺癌、信号转导子与转录活化子3、RNA干涉
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R73;X59
辽宁省教育厅基金资助项目20080415
2010-07-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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