HIF-1αsiRNA重组腺病毒对缺氧肺微血管内皮细胞HIF-1αt和ET-1表达的影响

摘要：

目的 研究缺氧诱导因子-1αsiRNA重组腺病毒(Ad/siHIF-1α)对缺氧肺微血管内皮细胞(RPMVECs)HIF-1α及其下游基因ET-1表达的影响.方法 原代培养肺微血管内皮细胞(RPMVECs);应用HEK293细胞大量扩增Ad/siHIF-1α.将RPMVECs分6组:A组(正常对照:常氧下5%CO2、95%空气、37℃培养);B组(含100 μmol/L COCl2培养基培养4 h);C组(Ad/siHIF-1α感染24 h后,加入COCl2培养4 h);D组(Ad/siHIF-1α感染48 h后,加入COCl2培养4 h);E组(Ad/siHIF-1α感染72 h后,加入COCl2继续培养4 h);F组(单纯腺病毒感染72 h后,加入COCl2培养4 h).采用荧光定量PCR法检测HIF-1α和ET-1mRNA表达;Western blotting法检测HIF-1α蛋白表达;ELISA法检测ET-1蛋白表达.结果 与B组比较,C、D及E组HIF-1αmRNA、HIF-1α蛋白表达显著下调,差异有显著性(均P<0.05);与B组比较,C、D及E组ET-1 mRNA、ET-1蛋白也相应下调,差异有显著性(均P<0.05).结论 Ad/siHIF-1α能够有效沉默缺氧诱导的大鼠肺血管内皮细胞HIF-1α基因,继而影响其下游ET-1基因的表达,为下一步在动物体内研究HIF-1α及其下游基因ET-1在新生儿肺出血发病机制中发挥作用.

关键词：小分子干扰RNA、缺氧诱导因子-1、内皮素-1、腺病毒、肺微血管内皮细胞、缺氧

所属期刊栏目：30

分类号：R77;R78

资助基金：广东省医学科研基金立项项目A2006536

在线出版日期：2009-09-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1046-1048