乙型肝炎病毒聚合酶基因重组腺病毒表达系统的构建和初步鉴定

摘要：

目的 构建乙型肝炎痛毒聚合酶基因(RT/RNaseH区段)腺病毒表达系统并初步鉴定其转录表达.方法 采用PCR方法从pUC19-1.24HBV质粒中扩增RT/RNaseH区段,将该片段与pCMV-Tag2B载体连接构建腺病毒穿梭载体,将其在Bj5183细菌中重组,获得的重组质粒转染到Ad293细胞中包装,待细胞裂解后收集合病毒的上清并感染Huh7细胞,48 h后通过RT-PCR鉴定目的 基因转录.结果 成功扩增HBV RT区并插入pC-MV-Tag2B载体,成功获得腺病毒重组质粒并在AD293中包装成病毒颗粒,病毒颗粒感染Huh7细胞后RT-PCR可以在Huh7细胞中检测到HBV RT区段mRNA转录.结论 成功构建乙型肝炎病毒聚合酶基因RT/RNaseH区段的腺病毒表达系统,该系统能在Huh7细胞中转录,但逆转录蛋白的表达仍待进一步检测.

关键词：HBV、聚合酶、重组腺病毒

所属期刊栏目：30

分类号：X17;TQ4

资助基金：国家自然科学基金资助项目30500434

在线出版日期：2009-05-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：166-168