F10下调通过细胞色素C促进KLE细胞凋亡

摘要：

目的 建立F10基因表达稳定下调的KLE细胞系.探讨F10基因沉默对KLE细胞凋亡的影响及机制.方法 将两条合成的寡核苷酸退火后形成的双链DNA连接到逆转录病毒载体pRetroQ上构建表达质粒pRetroQ-i F10,脂质体转染KLE细胞,嘌呤霉素筛选,获得单细胞克隆;荧光定量RT-PCR鉴定阳性克隆.流式细胞仪检测细胞凋亡,荧光定量RT-PCR和western blot检测细胞色素c和Bcl-2表达.结果 两个抗性克隆呈现F10 mRNA表达显著下调.F10基因沉默的KLE细胞克隆凋亡率较对照组增加近9倍,细胞色素C mRNA表达上调、胞浆细胞色素c表迭增加,Bel-2 mRNA和蛋白表达下调.结论 成功构建F10基因表达稳定下调的KLE细胞系,F10基因表达下调导致细胞凋亡;细胞色素C的释放可能是F10沉默诱导KLE细胞凋亡的途径之一.

关键词：F10基因、KLE细胞、RNA干扰

所属期刊栏目：29

分类号：R73;R91

资助基金：国家自然科学基金资助项目30672234

在线出版日期：2008-07-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：533-535