人骨唾液蛋白膜靶向表达载体的构建及在乳腺癌细胞中的表达

摘要：

目的构建人骨唾液蛋白(BSP)膜靶向表达载体,并转染人乳腺癌细胞,筛选获得稳定转染细胞,为进一步体内外研究BSP在乳腺癌骨转移中的作用奠定基础.方法通过PCR的方法从pB-hBSP载体中亚克隆人骨唾液蛋白hbsp基因,定向克隆至细胞膜靶向定位真核表达载体pDisplayTM中,构建中间重组载体pDisplay-hB-SP,再次通过PCR的方法从构建的pDisplay-hBSP载体中亚克隆出膜靶向信号肽、hbsp以及细胞膜定位蛋白基因,定向克隆至真核表达载体pIRES2-EGFP,构建重组复合载体pID-hBSP-EGFP,利用脂质体转染特异性骨转移的乳腺癌细胞.结果重组载体pDisplay-hBSP和pID-hBSP-EGFP插入目的片段的测序结果与Genbank中发表的BSP序列基本一致.结论成功构建了人骨唾液蛋白膜靶向表达载体,并且经转染后成功在特异性骨转移的乳腺癌细胞株MDA-MB-231BO中表达.为下一步进行体内外试验研究BSP在乳腺癌骨转移中的作用奠定基础.

关键词：骨唾液蛋白、细胞膜、绿色荧光蛋白、乳腺癌细胞、表达

所属期刊栏目：27

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：广东省博士启动基金04003534;广东省医学科研项目A2002536

在线出版日期：2006-06-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：659-661