HIV-1 B亚型包膜糖蛋白gp41基因真核表达载体的构建与鉴定

摘要：

目的克隆人类免疫缺陷病毒Ⅰ型B亚型包膜糖蛋白gp41基因并构建真核表达载体,进一步为制备自行设计的以λ噬菌体作为载体的HIV核酸疫苗奠定基础.方法以克隆好的HIV-1B亚型U26942全基因质粒DNA作为模板,根据Genbank中gp41基因的核苷酸序列设计引物,并在引物的5'端分别引入KpnⅠ及XhoⅠ酶切位点,特异性的扩增gp41基因.TA克隆后经双酶切、测序等鉴定重组质粒,再经双酶切、连接构建含gp41编码基因的真核表达载体,并进行酶切及测序鉴定分析pcDNA 3.1(+)/gp41.结果重组质粒经KpnⅠ,XhoⅠ双酶切成5.4kb与1.0kb的片断,表明表达载体pcDNA3.1(+)中插入了gp41基因片断,测序结果表明编码框正确.结论成功构建了HIV-1 B亚型包膜糖蛋白gp41基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)/gp41.

关键词：人类免疫缺陷病毒、pcDNA3.1(+)、gp41

所属期刊栏目：27

分类号：R4(临床医学)

资助基金：中国科学院资助项目39880032

在线出版日期：2006-05-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：458-460