bFGF荧光真核表达载体构建及表达

摘要：

目的构建可在哺乳细胞中表达碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)的荧光真核表达载体,以便进一步转染成骨细胞,研究bFGF基因转移在骨组织工程学中的应用.方法应用基因重组技术,将已经克隆的bFGF基因从PBR322-bFGF载体上亚克隆到荧光真核表达载体pEGFP-C3,构建的重组质粒经脂质体介导转染3T3细胞,36 h 后观察瞬时表达情况.结果①酶切、PCR和DNA序列鉴定均证实插入片段的正确性.②荧光显微镜下观察GFP的表达情况,观察到部分经转染的细胞发出绿色荧光;免疫组化检测bFGF的表达分泌情况,结果显示部分经转染的细胞呈阳性(棕色颗粒).结论成功地构建了bFGF荧光真核表达载体pEGFP-C3-bFGF,并在3T3细胞中表达了bFGF.

关键词：bFGF基因、荧光真核表达载体、转染

所属期刊栏目：23

分类号：R3(基础医学)

资助基金：广东省自然科学基金990006

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：796-798