抗CD4单克隆抗体可变区基因克隆及测序

摘要：

目的获取抗CD4单克隆抗体(McAb)可变区基因,为构建抗CD4嵌合抗体打下基础.方法从分泌抗人CD4 McAb的杂交瘤细胞系中提取总RNA,用家族特异性引物进行逆转录多聚酶链反应(RT-PCR),分别扩增出重链可变区(VH)基因及轻链可变区(VL)基因.将PCR产物克隆至p GEM-T载体,然后转化JM109细菌.并用全自动DNA序列分析仪对VH及VL基因序列进行测定.结果 VH基因为351bp,编码117aa残基;VL基因为333bp,编码111aa残基.根据K abat分类体系,VH隶属小鼠免疫球蛋白(Ig)重链Ⅱ(A)亚组,VL隶属小鼠Ig κ链Ⅲ亚组.结论从推导出的氨基酸序列证实,所获取的VH和VL序列均符合小鼠Ig可变区的氨基酸序列特征.

关键词：单克隆抗体、可变区、基因克隆、序列分析

所属期刊栏目：21

分类号：R3(基础医学)

资助基金：中国科学院资助项目39370628

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：636-638