基于快速定点突变研究含硒人Zeta型谷胱甘肽硫转移酶1c-1c的催化活性

摘要：

先将人Zeta型谷胱甘肽硫转移酶1c-1c(hGSTZ1c-1c)中非催化中心的Cys-137,Cys-154,Cys-165和Cys-205突变为Ser,然后将催化中心14,15和17位的3个氨基酸残基突变为Cys,再利用半胱氨酸缺陷型大肠杆菌表达系统将其特定地转化为Sec,即把GPx的催化基团引入到hGSTZ1c-1c中,高效地获得了具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活力的模拟酶.其中制备的3个含硒突变体15C,14C/15C和17C均显示出明显的GPx活力.对非含硒突变体性质研究发现,Ser-14或Ser-15任何一个残基发生突变都会导致hGSTZ1c-1c的GST活力几乎丧失,表明Ser-14和Ser-15在催化反应中发挥着重要作用,但前者主要参与底物结合,后者更侧重于催化.

关键词：快速定点突变、谷胱甘肽过氧化物酶、人Zeta型谷胱甘肽硫转移酶

所属期刊栏目：35

分类号：O629.7(有机化学)

资助基金：the National Natural Science Foundation of China.30970633,31270851;the Doctoral Funding Grants of Norman Bethune Health Science Center of Jilin University,China470110000006;the Undergraduate Innovative Training Program of China No.2013B73333.国家自然科学基金30970633,31270851;吉林大学医学部博士研究生优秀拔尖人才培育计划470110000006;大学生创新训练计划2013B73333

在线出版日期：2014-12-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2109-2113