10.3969/j.issn.1005-8567.2017.01.011
检测鸭坦布苏病毒NS1抗体ELISA方法的建立
为了检测鸭群中鸭坦布苏病毒的血清学流行情况,本研究在前期成功表达鸭坦布苏病毒NS1蛋白的基础上,建立了检测鸭血清中鸭坦布苏病毒抗体的间接ELISA方法.棋盘法确定了当纯化的NS1蛋白包被量为0.188μg/孔,待检血清1∶200稀释,HRP标记的兔抗鸭二抗1∶16000倍稀释时反应条件最佳.在最佳反应条件下,阴阳性临界值判定标准为0.467.用建立的间接ELISA方法对番鸭细小病毒、鹅细小病毒、鸭肝炎病毒、鸭疫里默氏杆菌阳性血清进行了检测,均无交叉反应,表明该方法具有良好的特异性.批内和批间重复试验的最大变异系数分别为6%和1 0%,显示该方法具有很好的稳定性.用建立的ELISA方法检测临床鸭坦布苏病毒感染鸭及攻毒蛋鸭的55份临床血清样品,测得52份为阳性,阳性率为94.5%,对36份阴性鸭群血清样品进行检测,36份为阴性,阴性率为100%.该方法为鸭坦布苏病毒的诊断和流行病学监测奠定了基础.
鸭坦布苏病毒、NS1蛋白、ELISA
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S858.32;Q349+.55(动物医学(兽医学))
广东省科技计划项目2013B020307001,2013B020315005,2014A040401048,2015B020203003,2015B050501007,2015B070701015;广东省农业科学院院长基金项目201412
2017-04-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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