10.3969/j.issn.1005-8613.2001.01.016
分子生物学技术在动物营养学上的应用及其发展前景(下)
@@(接上期)
2.2植酸酶的基因工程
植酸酶的研究已有近40年的历史,植酸酶作为一种单胃动物的饲料添加剂,其饲喂效果已在世界范围内得到广泛的确证,随着饲料工业的发展和分子生物学的兴起,从90年代开始的植酸酶的分子生物学研究,已成为世界性的研究热点之一。目前国内外研究的主要思路集中在通过基因工程这一手段解决饲用植酸酶的两个主要问题:一个是植酸酶在天然材料中表达水平太低,这造成植酸酶难以大量生产及生产成本过高的问题,通过基因工程技术,利用生物反应器则有望成百上千倍地提高它的表达量;另一个问题是天然植酸酶的一些酶学性质,如耐温性,pH适性、催化活性等不能完全适合饲料加工业和养殖业的要求,利用基因工程手段在分子水平上对植酸酶基因进行改造,从而提高其在饲料中使用的有效性。
2.2.1在微生物中高效表达植酸酶基因
目前,植酸酶基因表达的研究主要集中在来源于曲霉的植酸酶基因phyA和plyB上。Hartingsveldt等(1993)将来源于A.ficummNRRL3135的phyA基因导回原菌株,使phy基因的拷贝数增加到15个以上,从而使植酸酶的表达量提高到7600u/ml。Ehrlich等(1995)在A.oryzae中表达来源于酵母的植酸酶基因和来源于A.niger762的phyB基因,其结果也是使表达量分别提高到840u/ml和750u/ml,将植酸酶基因phyA置于来源于A.niger的淀粉葡萄糖甘酶(AG)启动子之下,信号肽序列分别用AG信号肽的18个氨基酸序列、AG信号肽的24个氨基酸序列及植酸酶原来的信号肽序列3种构建,将植酸酶基因重组到A.niger基因组中而获得植酸酶基因的阳性克隆子,在这3种构建中其植酸酶在重组菌株中的表达量分别达到了1.1,0.5,2.8×105u/ml,比原植酸酶产生菌株的表达量高约1000~3000倍左右。
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S816.3(普通畜牧学)
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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