枯草芽胞杆菌R31的原生质体制备方法优化

摘要：

枯草芽胞杆菌R31可用于香蕉枯萎病大田生物防治,但难以开展遗传操作,探讨适合R31的遗传转化方法有利于推动R31的防病分子机理研究.根据R31在LB培养基中的生长曲线和生长状态,对适合原生质体制备和再生所需的培养时间和溶菌酶浓度开展优化,结果显示,R31在LB培养基中培养3～6 h时处于对数生长期,培养7h后进入稳定期;显微镜观察显示,在对数生长前期,R31菌体以游离方式生长,培养5.5 h左右菌体开始相互连接,并逐渐形成网状结构,培养8h后菌体形成三维网状结构.游离方式的菌体有利于原生质体制备和再生,兼顾原生质体制备所需的菌体浓度,优化出的最佳培养时间为4～4.5 h,此时最佳的溶菌酶浓度为3.5 mg/mL,原生质体的形成率达到98.45％,再生率达到50.18％,再生细胞占初始细胞的比例达到49.40％.

关键词：枯草芽胞杆菌、原生质体制备、培养时间、溶菌酶

所属期刊栏目：42

分类号：S476(各种防治方法)

资助基金：广东省科技计划项目2014A020208015

在线出版日期：2016-04-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：107-110,封2