不同提取方法和不同组织对中华绒螯蟹DNA提取效果的比较研究

摘要：

为了优化中华绒螯蟹基因组DNA提取方法,采用酚-氯仿法和试剂盒法分别对中华绒螯蟹的鳃、肌肉、血淋巴液和刚毛4种组织进行DNA提取,并从纯度、浓度、片段完整性及微卫星标记PCR扩增效果4个方面评价提取DNA的质量.结果显示:酚-氯仿法提取的DNA片段比试剂盒法提取的更完整,且DNA浓度较高,但纯度稍低;无论何种提取方法,刚毛和血淋巴液中的DNA纯度都高于鳃和肌肉,4种组织中的DNA含量依次为鳃＞肌肉＞刚毛＞血淋巴液,未剪碎刚毛中未能提取到基因组DNA;微卫星标记的电泳结果表明,两种提取方法下4种组织中提取的DNA均可满足微卫星标记的应用要求.综上,本研究建立了一种简便的非损伤性中华绒螯蟹的采样及其DNA提取方法,这对于进行中华绒螯蟹遗传育种和分子标记研究等方面具有一定的积极作用.

关键词：中华绒螯蟹、DNA提取、酚-氯仿法、试剂盒法、不同组织

所属期刊栏目：41

分类号：S917.4(水产基础科学)

资助基金：国家“863”计划项目2012AA10A409-5;科技部科技型中小企业技术创新项目14C26213201214;上海市科学技术委员会项目13231203504,13DZ2280500;上海高校水产学一流学科建设项目沪教科2012-62

在线出版日期：2015-01-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：147-150