生物素-亲和素放大酶联免疫吸附法测定牛奶中雌三醇

摘要：

建立了检测牛奶中雌三醇的生物素-亲和素放大酶联免疫吸附测定法(BA-ELISA),实验最佳工作条件为,包被原浓度为125 ng/mL,生物化抗体的稀释倍数为1:16000,缓冲体系为pH=7.4的0.01 mol/L的PBS缓冲溶液,体系中甲醇浓度低于5％,生物素化抗体孵育时间和亲和素-HRP孵育时间均为30 min.在此最佳条件下,方法的检测范围(IC20～IC80)为0.149～3.27 ng/mL,灵敏度IC50=0.689 ng/mL.建立了液-液提取样品前处理方法,前处理净化后稀释10倍可消除基质效应,雌三醇牛奶样品加标回收率为94.9％～115.2％,CV<15％.与ELISA法相比,BA-ELISA具有更高的灵敏度,适于低浓度雌三醇的检测.

关键词：雌三醇、单克隆抗体、生物素-亲和素放大酶联免疫吸附法、液-液提取法

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分类号：TQ(化学工业)

资助基金：广东省省级科技计划项目2013B090600059;2017 年佛山市自筹经费类科技计划项目2017AB004141

在线出版日期：2018-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：72-75