与酵母单杂交系统匹配的植物瞬时表达分析载体的构建

摘要：

为了在植物细胞/原生质体中验证酵母单杂交系统解析的植物转录因子及其关键结构域,本研究构建了一套与酵母单杂交系统相匹配的植物瞬时表达分析系统,并在拟南芥叶片原生质体中进行了瞬时表达分析.结果 显示,以AtDPBF4的转录激活区(CRⅡ)构建的效应载体可在拟南芥原生质体中激活报告基因GUS的转录.这一结果与AtDPBF4的CRⅡ在酵母细胞中的结果一致.报告载体中,含有6个UASGal1的杂合启动子可引发下游报告基因GUS转录的酶活性达0.96 nmol 4-MU·mg-1·min-1;含有3个UASGal1的杂合启动子可引发GUS基因的酶活性达0.73 nmol 4-MU·mg-1·min-1.含有6个UASGal1的杂合启动子的强度明显强于含有3个UASGal1的杂合启动子,但其活性并不是3个UASGal1杂合启动子的2倍,仅比其活性高了31.5％.由此表明,在报告基因中增加GAL4结合位点(UASGal1)的重复序列可以提高下游报告基因的表达,但是这种活性升高趋势并不与UASGal1的重复数量呈线性关系.

关键词：酵母单杂交系统、植物瞬时表达分析系统、载体构建

所属期刊栏目：19

分类号：Q786;Q943.2;S828.2

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2021-06-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2616-2620