拟南芥AtZFN3基因RNA干扰载体的构建与表达

摘要：

为了构建具有发夹结构的RNAi表达载体来研究拟南芥AtZFN3基因表达的效果.根据拟南芥(Arabidopsis thaliana)锌指蛋白AtZFN3基因序列,设计含有酶切位点的两对特异性引物.以拟南芥cDNA为模板,分别合成用于构建干扰载体的正、反义DNA片段,将正、反义片段分别插入表达载体pART27的相应位置上,构建含有发夹结构的RNAi载体pART-ZFN3.利用农杆菌介导法,将pART-ZFN3转化到拟南芥中,PCR检测证实获得了5株转基因植株,经荧光定量PCR检测,证明了转基因植株中AtZFN3基因表达量显著低于未转基因的植株.结果表明:具有发夹结构的RNAi载体pART-ZFN3已构建成功,它对拟南芥AtZFN3基因的表达具有抑制作用,为深入分析拟南芥AtZFN3基因功能提供了基础.

关键词：拟南芥(Arabidopsis thaliana)、AtZFN3、锌指蛋白、RNAi

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资助基金：本研究由中央高校基本科研业务费专项资金项目2019ZY11

在线出版日期：2021-08-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：3620-3625