基于CRISPR/Cas9技术创建OssHSP家族基因突变体

摘要：

分子伴侣是在生物大分子的折叠、组装、转运及降解等过程中起协助作用,但自身并不发生任何变化的一大类广泛存在于生物体内的蛋白质分子.小热激蛋白(small heat shock protein,sHSP)是一类在抵抗逆境胁迫过程中扮演重要角色的蛋白质分子.本研究在OssHSP基因外显子区域设计了带有PAM序列的靶位点,利用PCR扩增获得OssHSP基因sgRNA表达盒,成功构建了CRISPR/Cas9敲除载体;利用根癌农杆菌介导的遗传转化获得2个OssHSP基因(OsO1g0136100和Os02g0782500)的T0代CRISPR转基因植株;通过PCR扩增和测序确定突变类型,获得48株不同突变类型的OssHSP1突变单株,6株不同突变类型的OssHSP2突变单株,6株不同突变类型的OssHSP1和OssHSP2双突变单株,为进一步开展OssHSP基因功能的研究提供了材料.

关键词：分子伴侣、OssHSP家族基因、CRISPR/Cas9技术

所属期刊栏目：17

分类号：S481.9;S512.103;Q943.2

资助基金：江西省自然科学基金;江西省杰出青年人才资助计划;国家自然科学基金;江西省研究生创新专项;南昌大学研究生创新专项;南昌大学研究生创新专项

在线出版日期：2019-11-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：6343-6349