中国沙棘ISSR-PCR反应体系的建立和优化

摘要：

本研究以青海东部地区中国沙棘为试验材料,以中国沙棘雌雄株叶片基因组DNA混池为模板,再用初筛的引物UBC-857用于ISSR体系的优化.采用正交实验并结合单因素实验方法进行优化中国沙棘ISSR-PCR反应体系,得到的最优20.0 μL反应体系为:DNA (10 ng/μL) 2.0μL,dNTPs (10 mmol/L) 1.6 μL,引物(10 μmol/L) 0.2 μL,10×PCR Buffer(含Mg2+15 μmol/L) 2.0 μL,Mg2+Cl (25 mmol/L) 2.0 μL,Taq DNA 聚合酶(5 U/μL) 0.2 μL.经过筛选,引物UBC807能够稳定地扩增出雌雄特异性条带.通过建立最优ISSR-PCR反应体系,为研究中国沙棘提供分子标记水平上的理论依据和技术方法.

关键词：沙棘、ISSR、PCR、单因素试验、正交试验

所属期刊栏目：17

分类号：R282.71;Q946;R931.5

资助基金：青海省科技厅项目;青海省科技厅项目;青海省科技厅项目

在线出版日期：2019-10-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：5357-5367