两种虾脊兰属植物DNA提取方法的优化

摘要：

植物叶片中含有的多糖、蛋白质和多酚等物质,很大程度会影响总DNA的提取质量.本研究以剑叶虾脊兰(Calanthe davidii)和银带虾脊兰(Calanthe argenteo-striata)幼嫩叶片为材料,采用改良CTAB法提取总DNA,设置样品重量(0.05 9,0.10g,0.20g)、清洗时间(10 min,20 min,30 min)、水浴温度(25℃,60℃,45℃)、水浴时间(2 h,1h,0.5h)4因素3水平正交试验,探究不同因素、不同处理对DNA得率和纯度的影响,以获取最佳提取条件.研究发现剑叶虾脊兰和银带虾脊兰DNA的最佳提取条件均为:样品重量0.2g、清洗时间30 min、水浴温度60℃、水浴时间2h.该处理下剑叶虾脊兰DNA产率最高为490.5 ng/μL,A260/A280均值为1.953;该处理下银带虾脊兰DNA产率最高为139.83 ng/μL,A260/A280均值为1.967.各因素对剑叶虾脊兰DNA产率影响次序为:样品重量＞清洗时间＞水浴温度＞水浴时间;各因素对银带虾脊兰DNA产率影响为:样品重量＞水浴温度＞清洗时间＞水浴时间.本研究为虾脊兰属的分子生物学研究提供科学依据.

关键词：虾脊兰属植物、正交试验、DNA提取方法优化、分子生物学

所属期刊栏目：17

分类号：Q943.2;S682.31;S816.17

资助基金：国家林业局森林公园工程技术研究中心科学技术研究项目;国家自然科学基金

在线出版日期：2019-03-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：494-501