道地药材咸丰白术ISSR反应体系优化及多态性引物筛选

摘要：

为了得到适宜的咸丰白术ISSR反应体系,采用两轮U12 (62×4)均匀设计的方法,对ISSR反应中各组分设置不同的梯度,分析反应体系各组分用量对扩增结果的影响.结果表明,在l8μL的ISSR反应体系中,引物0.29 μmol/L,2×Taq Master Mix 9.6 μL,模板DNA 47 ng时,扩增条带较清晰,多态性好.根据得到的优化体系,进一步开展白术的引物筛选,并从中得到了9条扩增条带相对清晰稳定、多态性较好的引物.对筛选的多态性引物开展了温度梯度PCR实验,发现温度对ISSR-PCR扩增结果影响显著.本实验通过采用均匀设计的方法,降低了常规体系优化实验所需次数,节省了时间和试剂的用量,为快速建立ISSR反应体系和后续咸丰白术遗传多样性分析提供了便利与帮助.

关键词：ISSR、道地药材、白术、体系优化

所属期刊栏目：16

分类号：R282;S567;S682.1+1

资助基金：湖北省农科院青年基金;湖北省技术创新专项;现代农业产业技术体系建设专项

在线出版日期：2018-12-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：7423-7428