山羽藓ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选

摘要：

本研究采用L16(45)正交试验设计法对山羽藓ISSR-PCR反应进行优化试验.研究结果表明,山羽藓ISSR-PCR最佳反应体系(25μL)为:Taq DNA聚合酶0.8U,Mg2+1.5 mmol/L,dNTPs 0.4 mmol/L,引物0.6 μmol/L和模板DNA 40 ng,对该反应体系的影响顺序为:TaqDNA聚合酶＞引物＞dNTPs＞模板DNA＞Mg2+.同时筛选出12条适合山羽藓的ISSR引物,并确定了每条引物的最适退火温度.所建立的体系稳定可靠,条带清晰且多态性丰富,可为后续开展山羽藓种植资源、遗传多样性及分子亲缘地理学研究奠定基础.

关键词：山羽藓、ISSR-PCR、正交设计、反应体系、引物筛选

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分类号：R282.5;S641.203.6;TS201.3

资助基金：国家自然科学基金31660050

在线出版日期：2018-06-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1895-1902