三角梅4,5-多巴双加氧酶基因的克隆与表达分析
本研究通过同源克隆技术对三角梅(Bougainvillea glabra Choisy)甜菜色素合成途径中4,5-多巴双加氧酶(4,5-DOPA dioxygenase,DOD)基因进行了克隆分析.随后将获得的三角梅DOD基因克隆到表达载体pET30b(+)上,构建原核表达载体pET30b (+)-DOD,并转入大肠杆菌Rosetta (DE3)进行诱导表达.同时结合实时荧光定量PCR技术分析了遮光处理对三角梅DOD表达量和甜菜红素含量的影响.结果表明,三角梅DOD基因的cDNA序列长度为804 bp,编码268个氨基酸,GenBank登录号为KY676801.系统进化树分析显示该DOD与叶子花(Bougainvillea spectabilis Willd.)和紫茉莉(Mirabilis jalapa L.) DOD亲缘关系比较近;原核表达得到约37kD的目的蛋白,这与预测结果相符合;实时荧光定量PCR结果表明,遮光处理使DOD表达量降低;同时,甜菜红素含量也表现为下降.这些研究结果为解析三角梅甜菜色素合成途径提供了理论依据,为三角梅花色形成机制的研究提供了基础资料.
三角梅、4、5-多巴双加氧酶、克隆、表达分析
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Q754;Q93;S662.2
四川省高等学校重点实验室科研项目GR-2013-C-04
2018-02-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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