番茄多梳蛋白家族基因LeEMF2的功能分析
多梳蛋白(Polycomb protein)在植物表观遗传调控中起重要作用.已公开的番茄转录组表明一个多梳蛋白基因LeEMF2在抗病番茄CLN2777A中受番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)诱导表达.为明确LeEMF2抗TYLCV的作用,我们以CLN2777A为材料,通过RT-PCR克隆该基因全长序列,荧光定量PCR研究LeEMF2的表达模式,并利用病毒诱导的基因沉默(VIGS)技术研究LeEMF2沉默后对番茄抗TYLCV的影响.LeEMF2的开放阅读框为1 917 bp,编码长为638个氨基酸的蛋白.结构域分析表明其含有一个C2H2锌指结构域以及一个VEFS盒,与拟南芥EMF2氨基酸相似度为58.3％.荧光定量PCR发现LeEMF2基因在花、根以及茎顶端生长点的表达量较高,在茎和老叶中表达量次之,在嫩叶中的表达量最低.接种TYLCV 5 d后,LeEMF2基因在CLN2777A中上调表达1倍左右,而在感病番茄TMXA48-4-0的表达则无明显变化.通过农杆菌浸润法将VIGS沉默载体注射CLN2777A子叶15d后,LeEMF2在沉默番茄植株中的表达量仅为野生型CLN2777A的13％～48％,且沉默株的植株新叶卷曲、皱缩,说明LeEMF2基因对番茄的生长发育、形态建成具有重要作用.LeEMF2沉默植株接种TYLCV 15 d后,荧光定量PCR检测发现沉默植株的病毒量为野生型植株的1.7倍,说明LeEMF2对TYLCV的抗性作用有一定的影响.
LeEMF2、番茄黄化曲叶病毒、病毒诱导基因沉默、功能分析
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S641.2;Q78;S436.412
江苏省自主创新项目CX122015
2016-03-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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