万寿菊雄性不育系SRAP-PCR体系建立与优化

摘要：

本研究以万寿菊雄性不育系2-2基因组DNA为试验材料，采用单因素和L16(45)正交设计对SRAP-PCR反应体系的Mg2+、dNTPs、Taq酶、引物和模板DNA浓度进行优化，以得到最佳的SRAP-PCR反应体系。结果表明最佳反应体系为：20μL体系中Mg2+2.0 mmol/L、dNTPs 0.3 mmol/L、Taq 酶0.75 U、引物0.2μmol/L、模板DNA 80 ng。应用建立的反应体系对退火温度进行优化，得到两步退火温度分别为35℃和50.2℃。最后用9个万寿菊雄性不育两用系材料组对所得PCR体系进行验证，证明该体系具有较高的稳定性和重复性，可为筛选与万寿菊雄性不育基因连锁的特异性标记奠定基础。

关键词：万寿菊、雄性不育系、分子标记、相关序列扩增多态性、体系优化

分类号：S51;S57

资助基金：青海省园林植物研究重点实验室发展专项2015-Z-Y17;2014年度“西部之光”人才培养计划“万寿菊两用系苗期育性鉴定分子标记开发”共同资助

在线出版日期：2015-07-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1388-1395