单叶省藤三种组织RNA提取和全长cDNA文库构建

摘要：

本实验比较了3种RNA提取方法提取单叶省藤的茎、雄花序和根的结果,改良CTAB法和Trizol法提取的RNA无明显降解、完整性好,均可用于cDNA文库构建,而异硫氰酸胍法提取的RNA降解严重;考虑到改良CTAB法成本较低,故推荐为首选方法.将茎、雄花序和根三种组织的RNA等量混合后,利用SMART策略构建了全长cDNA文库;通过涂平板培养后的菌落计数,测得初库滴度为2.91×105 cfu/μL;从培养平板上随机挑取16个菌落进行PCR检测,文库重组率为87.5%,插入片段平均长度为1.5 kb左右.所建文库的质量可靠,为下一步的EST测序和候选基因发现提供了材料基础.

关键词：单叶省藤、RNA提取、cDNA文库

所属期刊栏目：8

分类号：S79;S72

资助基金：国家科技支撑计划2006BAD19B0901;国家高技术研究发展计划重点项目2006AA100109

在线出版日期：2010-10-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：800-803