miR-204-3p靶向CYP2E1介导脂多糖诱导的肾小管上皮细胞损伤

摘要：

目的 探讨miR-204-3p靶向细胞色素P450家族2亚家族E成员1(CYP2E1)介导脂多糖(LPS)诱导的肾小管上皮细胞炎症反应及细胞凋亡的分子机制.方法 体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,qRT-PCR 与 Western blot 分别检测 miR-204-3p、CYP2E1 的表达量;实验分组:Con 组、LPS 组、LPS+miR-NC组、LPS+miR-204-3p 组、LPS+si-NC 组、LPS+si-CYP2E1 组、LPS+miR-204-3p+pcDNA 组、LPS+miR-204-3p+pcDNA-CYP2E1组;ELISA检测IL-6、TNF-α的水平;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验验证miR-204-3p与CYP2E1的靶向结合关系;Western blot检测Bcl-2、Bax的表达量.结果 与Con组比较,LPS组细胞中miR-204-3p的表达水平降低,CYP2E1的表达量升高,IL-6、TNF-α的水平升高,凋亡率和Bax蛋白水平升高,Bcl-2蛋白水平降低,差异有统计学意义(P＜0.05);与LPS+miR-NC组比较,LPS+miR-204-3p组IL-6、TNF-α水平降低,凋亡率和Bax蛋白水平降低,Bcl-2蛋白水平升高,差异有统计学意义(P＜0.05);与LPS+si-NC组比较,LPS+si-CYP2E1组IL-6、TNF-α的水平降低,凋亡率和Bax蛋白水平降低,Bcl-2蛋白水平升高,差异有统计学意义(P＜0.05);双荧光素酶报告实验证实miR-204-3p能够靶向结合CYP2E1;与 LPS+miR-204-3p+pcDNA 组比较,LPS+miR-204-3p+pcDNA-CYP2E1 组 IL-6、TNF-α 的水平升高,凋亡率和Bax蛋白水平升高,Bcl-2蛋白水平降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 miR-204-3p过表达可靶向调控CYP2E1的表达从而抑制LPS诱导的肾小管上皮细胞炎症反应及细胞凋亡.

关键词：miR-204-3p、CYP2E1、脂多糖、肾小管上皮细胞

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资助基金：河南省医学科技攻关计划联合共建项目LHGJ20190961

在线出版日期：2021-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：408-412