miR-142-5p对癫痫发作后神经元损伤的作用机制
目的 探讨miR-142-5p/APLN对癫痫发作后神经元损伤的影响及其调控机制.方法 构建大鼠海马神经元癫痫模型,正常神经元细胞作为正常对照组,以此神经元细胞为癫痫细胞模型组.取癫痫大鼠神经细胞分为anti-miR-142-5p组(转染anti-miR-142-5p)、anti-miR-con组(转染anti-miR-con)、miR-142-5p组(转染miR-142-5p mimics)、miR-con组(转染miR-con),NC组(未经任何处理的细胞);anti-miR-142-5p+si-con组(共转染anti-miR-142-5p与si-con)、anti-miR-142-5p+si-APLN组(anti-miR-142-5p与si-APLN).qRT-PCR与Western blot检测两组神经细胞中miR-142-5p与APLN的表达.ELISA法检测GSH与MDA含量.流式细胞仪检测细胞凋亡能力变化.双荧光素酶报告基因鉴定miR-142-5p的靶基因.Western blot检测Bax、Bcl-2蛋白表达.结果 miR-142-5p在癫痫细胞模型组神经细胞中表达上调(P<0.05).干扰miR-142-5p表达后大鼠神经细胞中GSH含量明显增加,MDA含量明显减少(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.05),Bax蛋白表达水平显著降低(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证明miR-142-5p可直接靶向结合APLN;沉默APLN的表达可部分逆转干扰miR-142-5p的表达对大鼠癫痫神经细胞的保护作用.结论 干扰miR-142-5p表达可能上调APLN的表达抑制神经细胞凋亡从而减轻癫痫发作后神经元损伤.
miR-142-5p、APLN、癫痫、神经元
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河南省医学科技攻关计划2018021009
2020-08-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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