登革病毒TaqMan MGB实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

摘要：

目的 建立登革病毒TaqMan实时荧光定量PCR快速检测方法及应用于临床.方法 根据1～4型登革病毒3’端非编码区的一段高度保守序列,设计一套型通用的引物和TaqMan MGB探针,以4个血清型登革病毒标准株为标准,以日本乙脑病毒和丙肝病毒作阴性对照,以包含登革病毒2型标准株(DENV-2 NGC株)3’非编码区349 bp片段的质粒DNA作标准品,对引物和TaqMan MGB探针的特异性、灵敏度进行分析,从而建立登革病毒实时荧光定量PCR检测方法.用该法对登革病毒野毒株和10份登革病毒患者血清进行检测.结果 TaqMan实时荧光定量PCR检测的1～4型登革病毒标准株及野毒株均为阳性,日本乙脑病毒和丙肝病毒均为阴性；检测灵敏度可达到每反应2个基因拷贝；检测的10份登革患者血清样本中,8份检测结果为阳性.结论 TaqMan MGB实时荧光定量PCR方法是一个快速、特异性强、敏感性高的检测登革病毒的方法,适用于登革病毒的临床早期诊断.

关键词：登革病毒、TaqMan MGB、实时定量RT-PCR、检测

所属期刊栏目：4

分类号：R37;R51

资助基金：国家科技重大专项2008ZX10004-007

在线出版日期：2012-09-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：158-162