实时荧光定量PCR法检测RNA干扰后的GES-1细胞中MYCT-1基因的表达

摘要：

目的 建立MYCT-1基因的实时荧光定量PCR(Real-time fluorescence quantitative PCR,RFQ-PCR)检测方法,检测RNA干扰(RNA interference,RNAi)后GES-1细胞中MYCT-1 mRNA 的表达水平,探讨不同剂量siRNA对MYCT-1基因的沉默效果.方法 取5×104对数生长期GES-1细胞,分别转染1 μg、2 μg、4 μg siRNA.转染第4天分别收集细胞提取总RNA,合成cDNA并进行RFQPCR检测,以未转染组作为对照.结果 加入1 μg、2 μg组MYCT-1表达量分别降低19.4%和55.2%,加入4 μg siRNA组细胞死亡.结论 成功建立了 MYCT-1基因的RFQ-PCR检测方法.加入2 μgsiRNA,脂质体与siRNA比例为4:1时,可使GES-1细胞中MYCT-1表达降低55.2%,为最佳实验条件.

关键词：MYCT-1基因、RNA干涉、实时荧光定量PCR

所属期刊栏目：3

分类号：R75;R44

资助基金：辽宁省自然科学基金20092084

在线出版日期：2011-05-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：93-95