大鼠骨髓间充质干细胞分离与培养方法的优化研究

摘要：

目的 探讨一个相对直接、简洁的方法分离、培养、纯化大鼠的骨髓间充质干细胞.方法 使用贴壁法分离大鼠的骨髓间充质干细胞,通过培养初期的频繁换液和传代过程中减少胰蛋白酶的暴露时间,达到骨髓间充质干细胞的纯化.使用流式细胞仪检测细胞表面标志物,MTT法检测细胞生长状况,暴露于不同的诱导培养基使细胞成骨、成脂,并向肝胆系分化.结果 分离所得的细胞阳性表达CD29, CD44,CD90,而对于造血细胞标志物CD45呈阴性.在成骨、成脂培养基的诱导下,细胞ALP、茜素红、油红O染色均呈阳性,并发现传至10代的细胞仍保持分化功能.我们将骨髓间充质干细胞贯续暴露于不同的细胞因子和激素,得到了表达肝细胞、胆管上皮细胞特异标志的子代细胞.结论 通过改良后的方法可以高效、简洁地分离出形态均一地大鼠骨髓间充质干细胞,并能够向多胚层的细胞分化.

关键词：大鼠、骨髓、间充质干细胞、分离、肝细胞、胆管上皮细胞

所属期刊栏目：37

分类号：TQ4;R95

资助基金：国家自然科学基金81170455;陕西省科技统筹创新工程项目81170455

在线出版日期：2015-11-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

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