一株嗜热梭菌β-1,4-葡聚糖内切酶基因的克隆及表达

摘要：

以嗜热梭菌(Symbiobacterium thermophilum IAM 14863)基因组DNA为模板克隆了编码葡聚糖内切酶的基因,同时将该酶基因构建于表达载体pET32a(+)中,获得重组表达载体pET32a-Glu,转化至E.coli BL21(DE3) PLYS中并进行表达.结果表明:该基因大小为l101 bp,共编码366个氨基酸；SDS-PAGE电泳结果表明该基因在E.coli BL21(DE3) PLYS中得到了有效表达,相对分子质量约为60 kDa,纯化后重组酶活力为103 U/mL;酶学性质实验结果表明:酶最适pH值为5左右,最适反应温度为55℃,且此酶具有良好的耐热性(75℃左右)和pH值稳定性.

关键词：纤维素、β-1、4-葡聚糖内切酶、嗜热梭菌、克隆、原核表达

所属期刊栏目：33

分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)

资助基金：吉林省科技厅课题20090553

在线出版日期：2012-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：82-86