利用等温滴定量热仪测定胰蛋白酶活性

摘要：

等温滴定量热技术可以直接测量化学反应吸收或者放出的热量.酶促反应伴随着吸放热过程,因此利用等温滴定量热仪可以测量酶活性.本文详细描述了等温滴定量热仪测定酶活性的原理、方法并对胰蛋白酶的活性进行了测试,研究了温度、转速、缓冲液等条件对胰蛋白酶活性的影响,并对实验过程中常见的滴定曲线形状进行了分析,结果表明温度变化导致kcat、km有明显的变化,ΔH没有明显的变化.不同的缓冲液中kcat、km没有明显的变化,但ΔH有明显的变化.对酶促反应的两种方法单次注入法和多次注入法进行了对比,结果表明单次注入法操作简单,多次注入法对酶浓度的变化更为敏感.

关键词：等温滴定量热仪、胰蛋白酶、酶活性

分类号：O646.5;R614.2+4;R944.9

资助基金：国家自然科学基金3100820

在线出版日期：2023-05-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：62-67