基于催化发夹组装和荧光共振能量转移的生物传感器检测EV71病毒

摘要：

以肠道病毒71型(EV71)为检测对象,建立了基于催化发夹组装(CHA)和荧光共振能量转移(FRET)的生物传感器.设计了检测EV71 VP1基因的CHA信号放大策略,该体系由一对发夹探针(H1、H2)构成,H1和H2分别标记了荧光基团Cy3和Cy5.当体系中有VP1基因时,可引发H1和H2催化自组装反应,从而使得Cy3和Cy5相互靠近并发生FRET,导致Cy3荧光信号降低,Cy5信号增强;当体系中没有VP1基因时,H1和H2则稳定存在于反应体系中,不发生FRET,只检测到Cy3的荧光信号.优化了缓冲液浓度、H1与H2的比例、反应温度和反应时间.在最优条件下,所构建的传感器的Cy5与Cy3的荧光强度比值与EV71 VP1基因浓度在0.5～20 nmol/L范围内呈良好的线性关系,检出限为73 pmol/L(3σ).咽拭子样品的加标回收率为99.6％ ～103.1％,相对标准偏差在0.3％ ～1.7％之间.本方法具有较好的特异性及抗干扰能力,在EV71监测和手足口病早期诊断方面具有良好的应用前景.

关键词：肠道病毒71型、催化发夹组装、荧光共振能量转移、生物传感器、手足口病

所属期刊栏目：51

分类号：TP273;R512.5;R373.2

资助基金：成都市科技局项目;四川大学大学生创新创业训练计划项目

在线出版日期：2023-02-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：93-101