集成式微流控液滴数字化等温扩增用于尿路感染细菌快速检测

摘要：

数字化核酸分析技术具有不依赖标准品的绝对定量分析能力,因而有利于实现病原分子的快速诊断.现有的数字化核酸分析方法通常采用离线式分析,操作繁琐且耗时较长,难以满足医疗资源有限情况下的检测需求.本研究建立了一种集成式微流控液滴数字化等温扩增方法.采用的微流控芯片集成了序列液滴核酸提取、负压驱动液滴生成和液滴环介导等温扩增(LAMP)功能,可采用集成化方式在1.5 h内完成细菌核酸数字化分析.此微流控芯片对大肠埃希氏菌的核酸提取效率为93.68％±32.38％;使用注射器负压驱动可在4 min内生成约20000个液滴,液滴体积的相对标准偏差(RSD)小于10％;液滴数字化LAMP检测动态范围跨越4个数量级(2.36×104～1.71×107 CFU/mL).利用本方法检测尿路感染临床标本(n=13)中的大肠埃希菌,与传统定量培养方法结果相比较,本方法的检测灵敏度和特异性均为100％(Kappa=1,p<0.01).本方法具有操作简便、定量分析准确的优点,为病原体的现场快速检测提供了一种有力的工具.

关键词：微流控芯片、集成、现场快速检测、液滴数字化核酸检测、尿路感染

所属期刊栏目：50

分类号：R378.2;S854.43;R978.1

资助基金：中国博士后科学基金;中国博士后科学基金;广东省自然科学基金;广东省自然科学基金;广东省自然科学基金;广东省自然科学基金;广州市第一人民医院红棉计划项目;广东省即时检测;企业重点实验室项目

在线出版日期：2022-08-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：1158-1167