发卡型万能传导在基于核酸分子线路的 基因诊断中的应用和性能优化

摘要：

核酸等温扩增技术作为核酸体外扩增技术,其反应过程始终维持在恒定温度下.与聚合酶链反应相比,核酸等温扩增反应具有优异的便携型,因而被视为最有望实现基因快检甚至即时快检的体外基因扩增方法.然而,由于反应过程中假阳性扩增频发、反应后对产物的检测方法缺乏特异性和灵敏度等缺点,限制了其在实际分析检测中的应用.通过构建发卡型结构万能中转探针,成功地将恒温扩增产物转到一套性能良好的已知核酸分子线路上;借助核酸分子线路的百倍放大性能和序列特异性,实现对上游基因序列信息的精准识别和放大信号输出.针对不同的待测序列,仅需改变发卡型中转探针的序列,即可实现对不同序列目标物的检测.基于中转探针的重要性,本研究对中转探针的设计原理和方法进行了重点阐述,提出并验证了一套行之有效的普适性设计规律,确保中转探针良好的中转效率(信噪比).利用这一规律获得的中转探针,与核酸分子线路偶联,可成功为低至近单分子(20个拷贝)的模型基因提供显著荧光和电化学信号输出.

关键词：等温扩增、万能中转、发卡型中转探针、核酸分子线路、催化发卡型结构自组装、荧光、电化学

所属期刊栏目：46

资助基金：国家自然科学基金项目21505129;吉林省自然科学基金项目20160101296JC;王宽诚率先人才计划-卢嘉锡国际团队项目资助 This work was supported by the National Natural Science Foundation of China21505129;the Natural Science Foundation of Jilin Province20160101296JC;K. C. Wong Education Foundation

在线出版日期：2018-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：865-874