转基因作物pat蛋白的双抗体夹心酶联免疫检测方法研究

摘要：

将克隆到的pat基因构建原核表达载体pET30(+)-pat并在大肠杆菌中进行表达,分离纯化得到高纯度pat蛋白.用所得到的pat蛋白制备了兔多克隆抗体和鼠单抗2F6.多抗效价＞8000,单抗效价为5×104；单抗为IgG1类,轻链为K型.基于抗pat蛋白单克隆抗体和兔多克隆抗体建立了双抗夹心酶联免疫分析方法(Sandwich ELISA).检测范围为1.6 ～ 100μg/L,线性回归方程y=0.6914x-2.572,决定系数为0.9951.用所建立的方法测定了5个转基因抗虫棉和2个非转基因棉花品种叶片中pat蛋白的含量,其中转基因抗虫棉中的3个品种检测出pat蛋白,其余均未检出pat蛋白.

关键词：转基因作物、pat基因、pat蛋白、双抗夹心酶联免疫检测法

所属期刊栏目：41

分类号：S43;S48

资助基金：转基因生物新品种培育重大专项2009ZX08012-017B

在线出版日期：2013-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1555-1560