基于核酸分子杂交的免疫芯片抗体固定新方法

摘要：

基于核酸分子杂交原理构建了一种新型抗体固定方法.先将抗体与寡核苷酸单链交联,再将两者的复合物与固相载体表面上的互补寡核苷酸链结合,从而将抗体固定到载体的表面.在磁珠表面对该固定方法进行实验,证明了方法的可行性.以本方法构建了针对转基因Bt Cry1Ac蛋白的免疫芯片,用Cy3标记二抗对其探针固定效果进行分析,并且在芯片上对Bt Cry1 Ac蛋白进行梯度浓度检测试验.结果表明,以本方法构建的抗体芯片,探针分布具有良好的特异性；探针层分布均匀,非特异吸附小；检测灵敏度达到0.01 ～ 0.05 μg/L;此外,通过杂交核酸双链的解离成功实现了芯片的再生,有助于解决传统抗体固定方法中芯片不可再生的问题.

关键词：免疫芯片、抗体固定、抗体-寡核苷酸复合物、核酸杂交

所属期刊栏目：41

分类号：R91;TP2

资助基金：国家863计划目标导向性课题2007AA10Z436;国家自然科学基金30972051;国家转基因生物新品种培育重大专项2009ZX08012-010B

在线出版日期：2013-04-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：199-204