肺癌组织蛋白质混合物检测方法学研究
采用无胶筛分毛细管电泳-激光诱导荧光法(NGS-CE-LIF)检测蛋白质,考察了分离条件对分离的影响,并对提取的肺癌组织蛋白质混合物进行分析,与毛细管电泳紫外检测(CE-UV)及常规蛋白质检测手段聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)进行比较.异硫氰酸酯(FITC)衍生蛋白质,筛分介质为0.05%(w/V) 聚环氧乙烷(PEO, Mr=300000),以TBE缓冲液 (pH 10.0)为电极缓冲液,分离电压为15 kV, 柱温15 ℃,氩离子激光器(λex=488 nm, λem=520 nm)检测.在此条件下可对6.5~200 kDa范围的蛋白质进行分离,分离效果较好,15 min内完成分离,理论塔板数(N)均值为9.12×104/m,检出限为0.28 mg/L.结果表明,本方法具有筛分介质浓度调节简便, 分离效果好, 时间短等优点,具有一定的实际应用价值;对提取肺癌组织蛋白质混合物进行检测,检测效率和效果优于CE-UV及PAGE.
肺癌、无胶筛分毛细管电泳、聚环氧乙烷、异硫氰酸酯、激光诱导荧光检测、蛋白质
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S83;O65
国家自然科学基金.20775089,30970312
2010-11-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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