超声波辅助Urea-Free试剂结合热变性快速酶解蛋白质

摘要：

建立了一个超声功率-超声时间的安全区域,在此范围内进行超声波辅助酶解时,能避免超声波随机断裂蛋白质;在此安全区域内采用响应面法获得最佳超声功率和超声时间.建立了超声波辅助Urea-Free试剂结合热变性快速酶解蛋白质的方法,将蛋白质依次进行10 min超声波浴辅助Urea-Free还原烷基化反应、90 ℃热变性15 min, 超声波辅助胰蛋白酶酶解15 s.应用此快速酶解方法鉴定3种典型标准蛋白质(牛血清白蛋白、细胞色素C和肌红蛋白),在25 min内达到与传统整夜酶解方法相同的鉴定结果,并获得更高的序列覆盖率.

关键词：超声波辅助、热变性、蛋白质、酶解、质谱

所属期刊栏目：38

分类号：TS2;O64

资助基金：国家科技支撑计划项目2008BAI63B01;生物反应器工程国家重点实验室专项经费2060204

在线出版日期：2010-06-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：663-667