改进的~(18)O同位素标记法标记蛋白质多肽
针对~(18)O同位素标记反应两个重要影响因素--肽段分散度和胰酶灭活方法,进行了标记条件的改进和灭活方法的优化.在H_2~(18)O中加入Rapigest~(TM) SF助溶剂并微波辅助加热,使α-酪蛋白胰酶酶切肽段的标记效率得到明显改进(~(18)O/~(16)O峰面积比值>99%).标记后,对胰酶进行还原烷基化化学修饰彻底灭活,使标记后的肽段稳定性显著提高,放置6 d不发生回交反应.对标准蛋白质甲状腺球蛋白酶切肽段混合物标记后的质谱实验结果表明:优化的标记方法能快速稳定地标记蛋白质酶切多肽.
(18)O同位素标记、多肽、蛋白质组
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R9 ;Q27
国家自然科学基金.20635010,20735005;国家重点基础研究发展规划项目2007CB914104
2010-04-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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