10.3321/j.issn:0253-3820.2008.01.007
联苯菊酯酶联免疫吸附分析方法研究
建立了定量测定联苯菊酯的间接竞争酶联免疫吸附分析方法(ic-ELISA).利用联苯菊酯的代谢物联苯醇合成了联苯菊酯的半抗原LBc(2-甲基-3-苯基苄基氧基羰基丙酸)和LBy(2-甲基-3-苯基苯甲酸).通过碳二亚胺法将LBc交联于牛血清蛋白(BSA)作为免疫抗原(LBc-BSA),通过活泼酯法将LBc和LBy分别交联于卵清蛋白(OVA)作为包被抗原(LBc-OVA和LBy-OVA),LBc-BSA为免疫原制备了联苯菊酯的兔抗血清,间接非竞争酶联免疫吸附分析方法测得其效价达5.12×104.通过同源异源分析,发现异源分析的灵敏度较高,对pH值、离子强度、甲醇含量等影响因素进行了研究,0.3 mol/L钠离子强度的磷酸缓冲液(pH 7.5)和30%的甲醇确定为联苯菊酯间接竞争酶联免疫吸附分析方法的最佳工作条件,该方法的IC50为2.16±0.32mg/L,检出限(LDL)为0.016±0.002 mg/L.对大部分拟除虫菊酯,如三氟氯氰菊酯、溴氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、甲氰菊酯和拟除虫菊酯的代谢物3-苯氧基苯甲酸没有明显的交叉反应.
联苯菊酯、多克隆抗体、酶联免疫吸附分析
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O65(分析化学)
国家高技术研究发展计划863计划2006AA108447;江苏省自然科学基金BK2005095;南京农业大学校科研和教改项目KJ06004
2008-04-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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