微流控芯片电泳-多重聚合酶链反应法同时测定多个单碱基多态性位点

摘要：

以微流控芯片电泳为检测平台,建立了多重PCR扩增法同时测定多个单碱基多态性(SNP)位点的方法.先通过PCR扩增得一段含所有待测SNP位点的长片段;用限制性内切酶消化成短片段,再将酶切反应产物与脱氧核糖核酸适配器(DNA adapter)相连;以连接产物为模板,分成两管,分别用n条等位基因特异性引物和一条通用引物进行n重PCR扩增;最后用微流控芯片电泳法分离PCR扩增产物,根据两管扩增产物的芯片电泳图谱中扩增片段的大小判断SNP的类型.以细胞色素P450 2D6(CYP2D6)基因中的5个SNP位点(100C＞T、1661G＞C、1758G＞T、2470T＞C和2850C＞T)为检测对象,考察了各等位基因特异性引物之间的相互影响和扩增反应的特异性,采用微流控芯片电泳法成功测定了20名健康中国人的CYP2D6基因中5个SNP位点的基因多态性,与聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法(PCR-RFLP)测定结果完全一致.

关键词：微流控芯片电泳、多重聚合酶链反应、脱氧核糖核酸适配器、单碱基多态性、药物代谢酶

所属期刊栏目：34

分类号：O6(化学)

资助基金：国家自然科学基金30270368

在线出版日期：2006-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1389-1394