液滴数字聚合酶链式反应芯片及其在致病菌检测中的应用

摘要：

设计与制作了一种基于聚二甲基硅氧烷-玻璃(PDMS-Glass)的多功能集成式液滴数字聚合酶链式反应(ddPCR)芯片,该芯片由产生液滴的PDMS模块和收集液滴的玻璃腔体模块组成.PDMS模块采用双通道的T形结构设计,液滴产生速度快且通量高,在30 min内可生成2×106个直径约为20 μm的微液滴.玻璃腔体模块中存储的液滴在整个实验过程中无需转移,可直接在原位PCR仪上进行扩增,每个液滴均是一个微反应器,经过多次热循环后,液滴仍能保持良好的稳定性.选用副溶血性弧菌(VP)作为食源性致病菌的研究模型,考察了ddPCR芯片对其基因组DNA的绝对定量能力,结果表明,该ddPCR芯片对VP基因组DNA绝对定量的线性范围宽,可跨越5个数量级(101 ～ 106 copies/μL),定量结果与DNA理论参考浓度间有很好的相关性.

关键词：数字PCR、液滴微流控芯片、致病菌、副溶血性弧菌

所属期刊栏目：36

分类号：O657;Q523(分析化学)

资助基金：国家自然科学基金21405167,81472751,61271162;上海晨光计划15CG54;国家科技重大专项2017ZX10302201-005-006

在线出版日期：2018-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1191-1196