10.11889/j.1000-3436.2016.rrj.34.010203
辐射诱导分子lnc-RI稳定敲低细胞系建立及其功能
制备lnc-RI干涉表达的慢病毒颗粒,建立lnc-RI稳定下调的HeLa细胞系,探索lnc-RI对细胞辐射敏感性的作用.首先将lnc-RI特异性干涉序列插入干涉表达载体pGLV2中,并制备慢病毒颗粒;然后,将慢病毒颗粒感染HeLa细胞,建立lnc-RI稳定下调的细胞系,并通过RT-PCR检测不同干涉序列对lnc-RI表达的干涉效果;最后,通过平板克隆形成实验分析lnc-RI表达下调对HeLa细胞放射敏感性的影响.结果显示,成功制备了携带 lnc-RI 干涉序列的慢病毒颗粒,并成功感染 HeLa 细胞,通过 RT-PCR 实验鉴定获得两株 lnc-RI稳定敲低细胞系.克隆形成实验发现,与对照相比,lnc-RI敲低的HeLa细胞系的放射敏感性增加.因此,初步证实lnc-RI表达下调增加HeLa细胞放射敏感性.
长链非编码RNA、lnc-RI、慢病毒、RNA干涉、电离辐射
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TL71(辐射防护)
国家自然科学基金面上项目81573083;国家自然科学基金青年项目81402631资助 Supported by the National Natural Science Foundation of China81573083 and 81402631
2016-04-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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