10.13609/j.cnki.1000-0313.2016.05.001
新型超顺磁性氧化铁标记SD大鼠脂肪干细胞的有效性及安全性研究
目的:采用新型超顺磁性氧化铁对 SD 大鼠来源的脂肪干细胞(ADSCs)进行标记,并与既往商用 SPIO 标记效果进行对比,探讨这种新型超顺磁性氧化铁标记的有效性及安全性。方法:分离、纯化、鉴定 SD 大鼠来源的 ADSCs,然后分不同浓度组(0、6、12、25、50和100μg/mL)和时间组(6、12、24和48 h)进行标记,通过普鲁士蓝染色测定铁标记率;在不影响细胞形态的前提下,对达到95%以上铁染色率的孵育浓度、时间进行标记安全性检测,包括活力、增殖力、细胞表面抗原表达;采用透射电子显微镜观察标记细胞的超微结构,采用 ICP-AES 对标记细胞内的铁含量进行测定,并与商用SPIO 标记效果进行对比。结果:在无细胞毒性的前提下,新型 SPIO 达到95%以上铁染色率的孵育浓度是12和25μg/mL,孵育时间是12 h;ICP-AES 检测显示具有表面正电荷的聚乙二醇(PEG)/聚乙烯亚胺(PEI)修饰的 SPIO 标记后细胞内的铁含量达到35.4 pg/cell(25μg/mL 中孵育12h 后)和20.16 pg/cell(12μg/mL 中孵育12h 后),并随着孵育浓度的增加,细胞内的铁含量增加;而具有表面零电荷的 PEG/聚乙烯吡咯烷酮(PVP)修饰的 SPIO 标记后的铁含量仅为6.96 pg/cell(25μg/mL 中孵育12h 后);透射电子显微镜显示标记后细胞器结构完整,内吸收的 SPIO 主要位于细胞质内的囊泡和溶酶体中。结论:新型 SPIO 在适当孵育浓度和时间下可以安全、快速标记 ADSCs;PEG/PEI 修饰的 SPIO 标记效果要远远比既往商用的 SPIO 快速有效,可作为一种优势的新型磁性标记物用于干细胞标记;而 PEG/PVP 修饰的SPIO 比起既往商用的 SPIO 并无明显优势,说明表面电荷在细胞标记中占有极其重要的角色。
新型超顺磁性氧化铁、脂肪干细胞、染色与标记、铁含量、表面电荷
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R814.3(放射医学)
2014广州市南沙区经贸科技与信息化局民生科技项目基金2014MS01;2014广州市医药卫生科技一般引导项目20141A010015;2015广州市科技计划项目科学专项一般项目基金1563000424;2015广东省科技计划项目技术开发类基金2014A020212034
2016-06-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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