新型超顺磁性氧化铁标记SD大鼠脂肪干细胞的有效性及安全性研究

摘要：

目的：采用新型超顺磁性氧化铁对 SD 大鼠来源的脂肪干细胞（ADSCs）进行标记，并与既往商用 SPIO 标记效果进行对比，探讨这种新型超顺磁性氧化铁标记的有效性及安全性。方法：分离、纯化、鉴定 SD 大鼠来源的 ADSCs，然后分不同浓度组（0、6、12、25、50和100μg／mL）和时间组（6、12、24和48 h）进行标记，通过普鲁士蓝染色测定铁标记率；在不影响细胞形态的前提下，对达到95％以上铁染色率的孵育浓度、时间进行标记安全性检测，包括活力、增殖力、细胞表面抗原表达；采用透射电子显微镜观察标记细胞的超微结构，采用 ICP-AES 对标记细胞内的铁含量进行测定，并与商用SPIO 标记效果进行对比。结果：在无细胞毒性的前提下，新型 SPIO 达到95％以上铁染色率的孵育浓度是12和25μg／mL，孵育时间是12 h；ICP-AES 检测显示具有表面正电荷的聚乙二醇（PEG）／聚乙烯亚胺（PEI）修饰的 SPIO 标记后细胞内的铁含量达到35．4 pg／cell（25μg／mL 中孵育12h 后）和20．16 pg／cell（12μg／mL 中孵育12h 后），并随着孵育浓度的增加，细胞内的铁含量增加；而具有表面零电荷的 PEG／聚乙烯吡咯烷酮（PVP）修饰的 SPIO 标记后的铁含量仅为6．96 pg／cell（25μg／mL 中孵育12h 后）；透射电子显微镜显示标记后细胞器结构完整，内吸收的 SPIO 主要位于细胞质内的囊泡和溶酶体中。结论：新型 SPIO 在适当孵育浓度和时间下可以安全、快速标记 ADSCs；PEG／PEI 修饰的 SPIO 标记效果要远远比既往商用的 SPIO 快速有效，可作为一种优势的新型磁性标记物用于干细胞标记；而 PEG／PVP 修饰的SPIO 比起既往商用的 SPIO 并无明显优势，说明表面电荷在细胞标记中占有极其重要的角色。

关键词：新型超顺磁性氧化铁、脂肪干细胞、染色与标记、铁含量、表面电荷

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分类号：R814.3(放射医学)

资助基金：2014广州市南沙区经贸科技与信息化局民生科技项目基金2014MS01；2014广州市医药卫生科技一般引导项目20141A010015；2015广州市科技计划项目科学专项一般项目基金1563000424;2015广东省科技计划项目技术开发类基金2014A020212034

在线出版日期：2016-06-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：386-392