包涵体蛋白纯化方法的探讨

摘要：

目的:探讨包涵体蛋白的表达条件及纯化方法.方法:将PQE30-Cystatin转化大肠杆菌M15,通过IPTG诱导蛋白表达.为了能够获得可溶的且有活性的Cystatin C(Cys C),本文摸索了Cys C包涵体的复性条件及蛋白表达条件.结果:改变缓冲体系pH值及离子强度等多种方法均不能减少蛋白在复性过程中的沉淀;同时,改变蛋白表达的OD600、培养基pH值、表达时间等均未得到可溶性的表达蛋白;而改变诱导蛋白表达所用的IPTG浓度后发现在低浓度(0.005mM)的IPTG诱导条件下,该蛋白有少量的表达,但是表达量明显低于1mM IPTG的诱导条件.结论:对于包涵体蛋白进行方法摸索的过程中,既要对包涵体蛋白本身进行研究,更要对蛋白表达条件进行进一步的优化,以表达可溶的蛋白.

关键词：半胱氨酸蛋白酶抑制剂C、包涵体、可溶性表达

所属期刊栏目：24

分类号：S85;R39

在线出版日期：2011-05-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：62-64