人NT-proBNP的克隆及原核表达

摘要：

目的:克隆人氨基末端脑钠肽(amino-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP)基因,构建原核表达载体并纯化表达产物.方法:采用PCR从正常成人cDNA中扩增NT-proBNP基因,将其克隆至pGEM-T中,测定其核苷酸序列.然后构建原核表达载体pGXE4T-2-NT-proBNP,用IPTG诱导表达,GSH-agarose亲和纯化蛋白.结果:经PCR扩增获得NT-proBNP基因,测序正确,在大肠杆菌中融合表达后,该蛋白的表达量占菌体总蛋白的20%,用SDS-PAGE和Western blot鉴定,显示其相对分子量34600.经亲和纯化后的GST-NT-proBNP的纯度可以达到96%,得率为1.8mg/100ml.结论:NT-proBNP的纯化成功,为建立NT-proBNP检测方法奠定了基础.

关键词：人氨基末端脑钠肽、克隆、原核表达、纯化

所属期刊栏目：19

分类号：R3(基础医学)

在线出版日期：2006-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：250-253