巴戟天-牛膝醇提物对SD大鼠软骨细胞G1/S周期蛋白与基因表达影响的实验研究

摘要：

目的：探究巴戟天-牛膝醇提物（M-AAE）对体外培养的SD大鼠软骨细胞G1/S周期蛋白与mRNA含量表达的影响，为其防治骨关节炎的临床应用提供依据。方法：①用乙醇加热回流法获得其醇提物成分；采用机械-酶消化法分离SD大鼠膝关节处的关节软骨，建立体外培养细胞模型并进行鉴定；②MTT法检测M-AAE对软骨细胞增殖特性的影响，使用倒置相差显微镜镜下观察软骨细胞状态；③PCR、Western blot法分别检测体外培养大鼠软骨细胞经M-AAE的0，75，150，300μg·mL-1 DMEM溶液干预48 h后的mRNA、蛋白含量的表达。结果：①软骨细胞经Ⅱ型胶原法染色后，阳性对照组胞浆区域浸染为棕黄色；②经MTT检测M-AAE对软骨细胞增殖具有一定的时效-量效关系，其最佳干预时间和浓度分别为48 h和150μg·mL-1；③M-AAE干预软骨细胞后，各加药组细胞周期蛋白依赖性激酶-4（CDK4）、细胞周期蛋白D1（CyclinD1）的mRNA与蛋白含量的表达量均明显高于0μg·mL-1组，其中以150μg·mL-1组的表达量最高（P <0.01），75μg·mL-1组和300μg·mL-1组在CDK4及Cyclin D1mRNA上比较，其表达量差异无统计学意义（P >0.05）。结论：M-AEE可上调CDK4、CyclinD1 mRNA及蛋白表达，对SD大鼠软骨细胞具有一定的促增殖作用。

关键词：骨关节炎、巴戟天、牛膝、醇提物、软骨细胞、增殖、大鼠

所属期刊栏目：6

分类号：R39;P7

资助基金：福建省自然科学基金2016J01779

在线出版日期：2017-04-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：5-9,32